توقف مسیر اتصال پایانی غیر همولوگی (NHEJ)، توسط مهارکننده زیرواحد کاتالیزوری کیناز پروتئین وابسته به DNA (DNA-PKcs)، با نام NU7026 مانع از تخریب HBV cccDNA توسط کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9) می شود

Suppressing the NHEJ pathway by DNA-PKcs inhibitor NU7026 prevents degradation of HBV cccDNA cleaved by CRISPR/Cas9

نتایج

سمی بودن مولکول های کوچک و تاثیرات بر پایداری و چرخه سلولی

طراحی کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9).

فعالیت ضد HBV، کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9) در یک محیط NHEJ/HR.

مهار NHEJ توسط NU7026 منجر به ویرایش بیش از حد میانی-کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9) از HBV ccDNA می شود.

بحث

مواد و روش ها

کشت سلولی و ترانسفکشن

مولکول های کوچک

تحلیل قابلیت زیستی سلول

ساختارهای CRISPR/Cas9.

جداسازی اسیدهای نوکلئیک

تحلیل PCR.

ایمونوفلورسانس (پرتوافشانی ایمن).

تشخیص آپوپتوسیس

توالی نسل-بعدی

تحلیل آماری

منابع

هپاتیت مزمن B، یک بیماری شدید کبدی است که توسط انتقال ویروس هپاتیت B (HBV) ایجاد می شود. DNA حلقوی بسته کووالانسی (cccDNA)، یک شکل استاندارد دوگانه فوق مارپیچ از ژنوم HBV، تعیین کننده اصلی پایداری ویروسی است. در حال حاضر، نوکلئاز های کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9) نشان داده شده اند تا DNA دو رشته ای را معرفی کنند که به HBV cccDNA شکسته می شود. آسیب تحمیلی، عمدتا در ترمیم نادرست cccDNA ، از  اتصال پایانی غیرهمولوگی (NHEJ)  ناشی می شود. NHEJ (اتصال پایانی غیرهمولوگی) پیشنهاد می شود تا فعالیت ضد HBV از کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9)را بهبود دهد و جهش cccDNA را افزایش دهد. در این تحقیق، ما فعالیت ضد HBV از کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9)و نتایج ترمیم cccDNA را در یک محیط NHEJ/HR اصلاح یافته، مورد ارزیابی قرار دادیم. NU7026، یک مهارکننده قوی NHEJ است که مانع از تخریب میانی کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9)از cccDNA شده است و منجر به حذف های تکرار شونده هدفمند شده است. ما نتیجه می گیریم که کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9)یک ابزار بسیار موثر برای تخریب cccDNA است و ابتدا نشان می دهد که مهار NHEJ باعث کاهش تخریب cccDNA می شود. 

ویروس هپاتیت B (HBV)، به طور مداوم، 250 میلیون نفر را در سراسر جهان آلوده می کند، و بیش از یک میلیون نفر از عواقب هپاتیت مزمن B (CHB) می میرند، که عمدتا سیروز و کارسینوم هپاتوسلولار (HCC) است (3-1) . HBV متعلق به خانواده هپادناویریده  است. ژنوم ویروسی ذره پوششی HBV شامل یک DNA دوگانه استاندارد جزئی سلولی است که از یک میانه RNA با استفاده از یک ترانس کریپتاز معکوس ، ترکیب می شود. پس از ورود، ویروس های HBV بدون پوشش هستند، و DNA حلقوی ساکن به نوکلئازی منتقل می شود که ان نوکلئاز از DNA حلقوی بسته کووالانسی (cccDNA) ترمیم می شود. cccDNA، مولفه کلیدی از چرخه عمر HBV است که بعنوان یک الگو برای رونویسی تمام RNAهای پیام رسان (mRNA) ویروسی شامل RNA پیش-ژنومی (pgRNA) بکار گرفته می شود (6-4).

توالی نسل-بعدی. نواحی هدف دار توسط کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9)و نواحی بدون هدف پتانسیل با استفاده از جفت پرایمرهای خاص و پلی مراز Q5 تقویت می شوند. امپلیکون ها با ژل تخلیص می شوند و با استفاده از کیت استخراج ژل کیاژن، استخراج می شوند، با یک فلورومتر کوبیت 2.0 (فناوری های عمر) اندازه گیری می شوند، و در نسبت های اکیومولار   یکی می شوند. سپس، آداپتورها برای توالی ایلومینا  پیوست می شوند. مجموعه اطلاعات (library) با 250 جفت بازخوانی نهایی با استفاده از ابزار MiSeq (ایلومینا) دنبال می شوند. نرم افزار FASTQC و نرم افزار جنیوس (Geneious ) برای ارزیابی کیفیت، همترازی منبع، دور انداختن بازخوانی های کیفیت پایین/ نوکلئوتیدها  ، و محاسبه جایگزین ها و ایندل ها، استفاده می شوند. کیفیت توالی از قبل- باز  و نمره های کیفیت پیش-توالی  در تمام گروه ها بیشتر از 30 بودند. 

Chronic hepatitis B is a severe liver disease caused by hepatitis B virus (HBV) infection. Covalently closed circular DNA (cccDNA), a super-spiralized, double-stranded form of the HBV genome, is the major determinant of viral persistence. CRISPR/Cas9 nucleases have been recently shown to introduce doublestranded DNA breaks into HBV cccDNA. The inficted damage results predominantly in erroneous repair of cccDNA by non-homologous end-joining (NHEJ). NHEJ has been suggested to enhance anti-HBV activity of CRISPR/Cas9 and increase cccDNA mutation. In this study, we assessed anti-HBV activity of CRISPR/Cas9 and cccDNA repair outcomes in an altered NHEJ/HR environment. NU7026, a strong inhibitor of NHEJ, prevented CRISPR/Cas9-mediated degradation of cccDNA and resulted in frequent on-target deletions. We conclude that CRISPR/Cas9 is a highly efective tool to degrade cccDNA and frst demonstrate that inhibiting NHEJ impairs cccDNA degradation.

Hepatitis B virus (HBV) chronically infects 250 million people worldwide, and more than a million people die from consequences of chronic hepatitis B (CHB), mainly cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC)1–3 . HBV belongs to the family Hepadnaviridae. Te viral genome of the enveloped HBV particle comprises a circular, partially double-stranded DNA that is synthesized from an RNA intermediate using a reverse transcriptase. Upon entry, HBV virions are uncoated, and relaxed circular DNA is transported into the nucleus where it is repaired to form covalently closed circular DNA (cccDNA). cccDNA is the key component of that HBV life cycle that serves as a template for transcription of all viral mRNAs including pre-genomic RNA (pgRNA)4–6

Next-generation sequencing. Regions targeted by CRISPR/Cas9 and potential off- arget regions were amplifi d using pairs of specific primers and Q5 polymerase. Amplicons were gel-purifi d and extracted using Qiagen gel extraction kit, quantifi d with a Qubit 2.0 Fluorometer (Life Technologies), and pooled in equimolar ratios. Adapters for Illumina sequencing were then attached. Libraries were sequenced with 250 paired-end reads using the MiSeq instrument (Illumina). FASTQC sofware and Geneious sofware were used for quality assessment, reference alignment, discarding low-quality reads/nucleotides, and calculating substitutions and indels. Per-base sequence quality and per-sequence quality scores in all groups were >30.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

توقف مسیر اتصال پایانی غیر همولوگی (NHEJ)، توسط مهارکننده زیرواحد کاتالیزوری کیناز پروتئین وابسته به DNA (DNA-PKcs)، با نام NU7026 مانع از تخریب HBV cccDNA توسط کریسپر/کَس 9 (CRISPR/Cas9) می شود

Suppressing the NHEJ pathway by DNA-PKcs inhibitor NU7026 prevents degradation of HBV cccDNA cleaved by CRISPR/Cas9

به روز‌رسانی در مورد هپاتیت ویروسی در دوران بارداری

Update on viral hepatitis in pregnancy

چکیده

نکات کلیدی

هپاتیت A

عواقب بالینی HAV در دوران بارداری

تشخیص

پیشگیری

هپاتیت B

پیامدهای بالینی HBV در دوران بارداری

خطر انتقال HBV از مادر به کودک

غربالگری و تشخیص

درمان عفونت HBV در بارداری

زایمان و شیر‌دهی

عفونت همزمان با هپاتیت D

نکات اصلی

هپاتیت C

درمان

هپاتیت E

تشخیص

درمان و پیشگیری

چکیده

زنان باردار مبتلا به هپاتیت ویروسی حاد در مقایسه با زنان باردار مبتلا به هپاتیت ویروسی مزمن بیشتر در خطر ابتلا به بیماری و مرگ هستند. خطر مرگ توسط هپاتیت ویروسی حاد نوع E بالاتر است، و میزان انتقال به نوزاد با عفونت ویروسی هپاتیت نوع B (HBV) ممکن است بیشتر باشد. مدیریت هپاتیت ویروسی در دوران بارداری مستلزم موارد زیر است: ارزیابی خطر انتقال به نوزاد، تعیین سن بارداری در زمان عفونت و خطر فروپاشی مکانیسم‌های دفاعی مادر، و شناختن عوارض داروهای ضدویروسی.

نکات کلیدی

جلوگیری از انتقال عمودی عفونت HBV در دوران بارداری کلید کاهش بار جهانی این عفونت است. غربالگری جهانی مادر و ایمنوپروفیلاکسی فعال-غیر‌فعال نوزادان باعث کاهش انتقال HBV می‌شود، اما افزودن درمان ضدویروسی برای کاهش بیشتر نا‌رسایی ایمنوپروفلاکسی ضروری است.

درمان و پیشگیری

بستری شدن برای زنان باردار باید در نظر گرفته شود. ریباویرین یا اینترفرون-آلفای پگیله یا هر دوی آن‌ها مؤثر هستند ولی به علت خطر تراتوژنی در دوران بارداری منع مصرف دارند(41،42). پیوند فوری کبد می‌تواند گزینۀ موفقی در نارسایی حاد کبدی باشد. پیشگیری عمدتاً متکی بر رعایت اصول بهداشتی خوب، آب آشامیدنی تمیز و اجتناب از مصرف گوشت خام خوک و گوشت شکار است. جوشاندن و کلر زدن آب، HEV را غیر‌فعال می‌کند(39،40). باید توصیه شود، زنان باردار از سفر به مناطق بسیار اندمیک (دارای بیماری همه‌گیر بومی) اجتناب کنند.

Abstract

Pregnant women with acute viral hepatitis are at higher risk of morbidity and death than pregnant women with chronic viral hepatitis. The risk of death is highest with acute viral hepatitis E, and the rate of transmission to the baby may be highest with hepatitis B virus (HBV) infection. Managing viral hepatitis in pregnancy requires assessing the risk of transmission to the baby, determining the gestational age at the time of infection and the mother’s risk of decompensation, and understanding the side effects of antiviral drugs.

KEY POINTS

Preventing vertical transmission of HBV infection in pregnancy is key to decreasing the global burden of this infection. Universal maternal screening and passive-active immunoprophylaxis of newborns have reduced transmission of HBV, but the addition of antiviral therapy is necessary to further decrease immunoprophylaxis failure.

Treatment and prevention

Hospitalization should be considered for pregnant women. Ribavirin or pegylated interferon alpha or both are effective but are contraindicated in pregnancy because of the risk of teratogenicity.41,42 Urgent liver transplant can be a successful option in acute liver failure. Prevention relies primarily on good sanitation, clean drinking water, and avoiding raw pork and venison. Boiling and chlorination of water inactivate HEV.39,40 Pregnant women should be advised to avoid travel to highly endemic areas.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

به روز‌رسانی در مورد هپاتیت ویروسی در دوران بارداری

Update on viral hepatitis in pregnancy

طراحی مجدد تئوری خودمراقبتی اورم برای بیمـاران هپاتیت مزمن

Re-designing Orem’s Self-care Theory for Patients with Chronic Hepatitis

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

طراحی مجدد تئوری خودمراقبتی اورم برای بیمـاران هپاتیت مزمن

Re-designing Orem’s Self-care Theory for Patients with Chronic Hepatitis

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

الگوی اپیدمیولوژی ویروس هپاتیت A در دانشجویان پرستاری و پیروی از معیارهای پیش گیری در دو بخش آموزشی در یک بیمارستان دانشگاهی

Pattern of Hepatitis A Virus Epidemiology in Nursing Students and Adherence to Preventive Measures at Two Training Wards of a University Hospital

چکیده
1- پیش زمینه
2- اهداف
3- بیماران و روش ها
3-1- جمعیت تحت مطالعه
3-2- آزمایش های سرولوژى ( بررسی سرم خونی)
3-3- سازگاری با معیار های پیش گیری
3-4- تحلیل آماری
4- نتایج
5- مباحث
منابع

چکیده

پیش زمینه : دانشجویان پرستاری در معرض بیماران مبتلا به ویروس هپاتیت A (HAV) هستند و ممکن است یکی از عوامل انتقال این بیماری به پرسنل درمانی، بیماران و حتی خویشاوندان باشند.
اهداف : هدف این مطالعه، ارزیابی عفونت HAV در دانشجویان پرستاری در دوره ی انترنی آن ها می باشد.
بیماران و روش ها : یک تحقیق در رابطه با شیوع سرمی عفونت HAV بر روی دانشجویان پرستاری بیمارستان دانشگاهی کاگلیاری همراه با ارزیابی سازگاری دانشجویان با معیار های پیش گیری برای کاهش خطر عفونت در طول دوره ی انترنی آن ها انجام شد. نمونه های خون از 253 دانشجو دریافت شد. تمام نمونه های سرم از نظر آتی بادی های ضد HAV ( IgG) از طریق آزمایش های سیستم ایمنی مرتبط با آنزیم ها (ELISA) تست شد. سازگاری با معیار های پیش گیری نیز توسط پرسنل آموزش دیده ثبت شد.
نتایج : مثبت بودن آزمایش های HAV در سرم خونی دانشجویان پرستاری ( میانگین سنی 24 ، بازه ی 17 تا 45 سال) به مقدار 3% بود . سازگاری با معیار های پیش گیری نیز به صورت یکنواخت نبود ( از 6% تا 76% ) و در بعضی از معیار های مرتبط با کاهش انتقال از طریق خوراکی – مدفوع، این معیار ها در سطح بسیار پایینی قرار داشت.
جمع بندی : بخش زیادی از دانشجویان که در معرض آلودگی به HAV قرار دارند می توانند منجر به افزایش خطر انتقال عفونت های بیمارستانی بشوند، به خصوص در شرایطی که معیار های خاص پیش گیری به صورت کامل مورد استفاده قرار نمی گیرد. بسته های آموزشی پرستاری قبل از شروع دوره های انترنی پزشکی باید اجرا شود تا سازگاری پرستاران و دانشجویان با معیار های پیش گیری به خصوص در بخش هایی که خطر بالایی از انتقال عفونت وجود دارد، افزایش پیدا کند. همچنین در بخش هایی که خطر باز هم بالاتر می باشد، باید برنامه های واکسیناسیون را در نظر گرفت.

5- مباحث

یافته های ما نشان می دهد که نرخ HAV در سرم خونی دانشجویان پرستاری بین 1% تا 15% در گروه سنی 19 تا 28 سال و 29 تا 38 سال به ترتیب، متغیر می باشد. نرخ شیوع این بیماری در سروم خونی آن ها در مقایسه با یک مطالعه جدید که در همین حوزه در سال 2008 انجام شده بود، نسبتا پایین تر بود که در این مطالعه مشخص شد که در بازه ی سنی 20 تا 29 سال نرخ شیوع 7.3% و در بازه ی سنی 30 تا 39 سال ، نرخ شیوع در حد 24.2% بوده است (4). کاهش محسوس در شیوع HAV در سروم خونی افراد در سال های قبل، منجر به شکل گیری سیستم ایمنی گروهی ضعیفی نسبت به این بیماری شده است. علاوه بر این، کاهش نرخ عفونت این بیماری در بین کودکان و افراد بالغ ، منجر به افزایش عفونت در افراد بالغ می شود (8و9) که منجر به مشکلات جدی شده که در بین گروه های افراد مسن، این موضوع رایج تر می باشد (4).

Abstract

Background: Nursing students can be exposed to patients with hepatitis A virus (HAV) and can represent a vehicle of transmission both for health personnel, patients and relatives.
Objectives: The aim of this study was to assess the risk of HAV infection in nursing students during their internship. Patients and Methods: A seroprevalence survey on HAV infection was performed on nursing students at the Cagliari universityhospital, together with the assessment of the compliance to preventive measures to decrease the risk of infection during their internship. Blood specimens were obtained from 253 students. All serum samples were tested for anti-HAV antibodies (IgG) by the enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). Compliance to preventive measures was recorded by trained personnel.
Results: Overall HAV seropositivity in nursing students (mean age 24, range 17 – 45 years) was 3%. Compliance to preventive measures was not uniform (6% – 76%) and extremely low in some specific measures targeted to decrease the oral-fecal transmission.
Conclusions: The high proportion of susceptible nursing students can contribute to an increase in the risk of nosocomial transmission, especially when specific preventive measures are not completely applied. Nursing education packages, before starting medical internship, should be implemented in order to increase their compliance to preventive measures, especially in wards at higher risk. Vaccination should be considered in wards at higher risk.

5- Discussion

Our findings showed that the HAV rate of seroprevalence among nursing students ranged between 1% and 15% in the age groups from 19 to 28 years, and from 29 to 38 years, respectively. The seroprevalence rate was relatively low compared with a recent study conducted in the same area in 2008, which showed seroprevalence ratios of 7.3% in the age group from 20 to 29 years, and 24.2% in the age group of 30 to 39 years (4). The dramatic decrease in HAV seroprevalence in the previous recent years resulted in a lack of protective herd immunity. Moreover, decreasing rate of HAV infection in children and young adults increases the risk of infection in adults (8, 9) with possible serious and clinically severe complications, that are more common in older age groups (4).

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

الگوی اپیدمیولوژی ویروس هپاتیت A در دانشجویان پرستاری و پیروی از معیارهای پیش گیری در دو بخش آموزشی در یک بیمارستان دانشگاهی

Pattern of Hepatitis A Virus Epidemiology in Nursing Students and Adherence to Preventive Measures at Two Training Wards of a University Hospital

مدل سازی مکانیسم عفونت حاد ویروس هپاتیت ب

Modeling the mechanisms of acute hepatitis B virus infection

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

مدل سازی مکانیسم عفونت حاد ویروس هپاتیت ب

Modeling the mechanisms of acute hepatitis B virus infection

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

سیر تکاملی ویروس هپاتیت B مقاوم به مولتی دراگ در حین درمان پی در پی

Evolution of Multi-Drug Resistant Hepatitis B Virus During Sequential Therapy

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

سیر تکاملی ویروس هپاتیت B مقاوم به مولتی دراگ در حین درمان پی در پی

Evolution of Multi-Drug Resistant Hepatitis B Virus During Sequential Therapy

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

نظارت بر مقاومت دارویی در بیماران مبتلا به ویروس مزمن هپاتیت B در طول درمان لامیوودین: بررسی کارایی تحقیق INNO-LiPA HBV DR

Monitoring Drug Resistance in Chronic Hepatitis B Virus (HBV)-Infected Patients during Lamivudine Therapy: Evaluation of Performance of INNO-LiPA HBV DR Assay

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

نظارت بر مقاومت دارویی در بیماران مبتلا به ویروس مزمن هپاتیت B در طول درمان لامیوودین: بررسی کارایی تحقیق INNO-LiPA HBV DR

Monitoring Drug Resistance in Chronic Hepatitis B Virus (HBV)-Infected Patients during Lamivudine Therapy: Evaluation of Performance of INNO-LiPA HBV DR Assay

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

گیاهان دارویی در برابر ویروس هپاتیت C

Medicinal plants against hepatitis C virus

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

گیاهان دارویی در مقابل ویروس هپاتیت سی

Medicinal plants against hepatitis C virus

• برای دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf بر روی عنوان انگلیسی مقاله کلیک نمایید.
• برای خرید و دانلود ترجمه فارسی آماده با فرمت ورد، روی عنوان فارسی مقاله کلیک کنید.