دانلود ترجمه مقاله تاثیر ایمونوژن بر روی پاسخ ایمنی ذاتی، بیان ژن های مرتبط با ایمنی و مقاومت (ساینس دایرکت – الزویر ۲۰۱۴)

تاثیر ایمونوژن بر روی پاسخ ایمنی ذاتی، بیان ژن های مرتبط با ایمنی و مقاومت در برابر بیماری ماهی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss)

The effects of dietary Immunogen® on innate immune response, immune related genes expression and disease resistance of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)

چکیده
۱ مقدمه
۲ مواد و روش‌ها
۳ نتایج
۴ بحث
منابع

چکیده
این مطالعه، اثرات ایمنوژن پری بیوتیک روی لیزوزوم، TNFα و  بیان ژن HSP70  فوق کلیه، پارامترهای ایمنی ذاتی هومورال و مقاومت به Aeromonas hydrophila در ماهی قزل آلای رنگین کمانی را بررسی می‌کند. ۱۲۰ ماهی قزل آلای رنگین کمانی (۸۱٫۶۵+_۱٫۴۹g) در شش تانک فایبرگلاس در دو گروه تغذیه‌ای بررسی شده‌اند که یکی از آن‌ها گروه شاهد و دیگری گروه آزمایش ‌بوده‌است که با  ۲g/kg از ایمنوژن به مدت ۴۵ روز تغذیه ‌شده‌است. نتایج نشان دادند که استفاده از ایمنوژن به طور قابل توجهی (p<0.05) باعث تنظیم بیشتر لیزوزیم و بیان ژن TNFα ‌می‌شود. بیان ژن HSP70 به طور قابل ملاحظه‌ای (p<0.05) در ماهی‌هایی که با ایمونوژن تغذیه ‌شده‌اند، در پایان آزمون پایین‌تر ‌بوده‌است. پارامترهای ایمنی ذاتی خونی (فعالیت لیزوزیم، ACH50 و اسیدیته باکتریایی) به طور قابل ملاحظه‌ای (p<0.05) در ۱۵ یا ۴۵ روز بعد از تغذیه با رژیم غذایی حاوی ایمونوژن افزایش یافته‌است. اگرچه، افزایش قابل توجه (p<0.05) در تیتر آنتی بادی آگلوتیناسیون فقط ۴۵ روز بعد از تغذیه با ایمونوژن افزایش می‌یابد. ماهی‌های قزل آلای رنگین کمانی تغذیه شده با ۲g/kg ایمنوژن، مقاومت بسیار بالاتری نسبت به  A.hydrophila (میزان زنده ماندن ۶۴٫۴۴%) نسبت به گروه کنترل (۲۴٫۴۴%) نشان داده‌اند. این نتایج تایید ‌می‌کند که ایمونوژن می‌تواند بیان ژن‌های مربوط به ایمنی را بیشتر تنظیم کند، پاسخ ایمنی را تحریک کند که در نهایت مقاومت به بیماری را در ماهی‌های قزل آلای رنگین کمانی افزایش می‌دهد. 

۲- مواد و روش‌ها
۲-۱- پرورش ماهی و آزمون خوراک دهی
۱۲۰ ماهی قزل آلای رنگین کمانی (۸۱٫۶۵+_۱٫۴۹g) از پرورش ماهی در ماهی سرا (کرج، ایران) به دست آمدند و به آزمایشگاه بیماری‌های شیلات در دانشگاه تهران منتقل شدند. بعد از چک کردن حالت سلامت، آن‌ها به طور مساوی در شش محفظه فایبرگلاس نگهداری شدند (۱۰۰۰L) که دو سطح از ایمنوژن را با سه تکرار دریافت کرده‌اند ( ۰ و ۲ گرم به ازای هر کیلوگرم) (پری بیوتیک تجاری). ماهی‌ها به مدت ۱۰ روز در شرایط آزمایشگاهی نگهداری شدند و در طی نگهداری با (۲% BW) با رژیم غذایی ماهی‌های قزل آلای رنگین کمانی دو بار در روز تغذیه شدند. در طی یک آزمایش تجربی (۵ هفته ای) ماهی دوبار در روز به صورت دستی تغذیه می‌شد (ساعت ۹ صبح و ۵ بعد از ظهر). نسبت غذا خوردن هر دو هفته یکبار و بعد از ۲۴ ساعت گرسنگی تنظیم ‌ و وزن کشی انجام ‌می‌شود. دمای آب، اکسیژن محلول و pH هر روز بررسی ‌می‌شود و به ترتیب برابر با ۱۸±۱٫۲ °C، ۶٫۶ ±۰٫۳mg/L و ۶٫۹±۰٫۴ است.

۲-۲- آماده سازی رژیم
یک دوز تکی از ایمنوژن (۲g/kg) در یک رژیم پایه‌ای فرموله شده برای ماهی قزل آلای رنگین کمانی ادغام ‌شده‌است (پروتئین خالص، ۴۵٫۳%، چربی خالص ۹٫۱%، انرژی ناخالص ۲۰٫۴Mj/kg). اجزای رژیم با آب مخلوط می‌شوند تا یک خمیر را ایجاد کنند که سپس از یک چرخ گوشت عبور می‌کنند که با یک صافی ۴٫۸mm تجهیز ‌شده‌است تا ته نشست‌های یکنواختی را ایجاد کند. رژیم‌های ته نشست‌ها در ۴۰°C خشک می‌شوند و در کیسه‌های پلاستیکی در -۴°C نگهداری می‌شوند تا زمانی که مورد استفاده قرار بگیرند.

۲-۳- پارامترهای هماگلوتینین
ماهی‌ها برای آنالیز هماگلوتینین مورد بررسی قرار می‌گیرند و برای این کار از پودر میخک استفاده ‌می‌شود (۲۰۰ppm، ۲۰ دقیقه) و نمونه‌های خونی از رگ وابسته به دم گرفته ‌می‌شود. نمونه‌ها به لوله‌های دارای هپارین منتقل می‌شوند و گلبول‌های قرمز خون و گلبول‌های سفید خون روی اسلایدهای هموسیتومتر براساس روش سردار و همکارانش، شمرده می‌شوند. هماتوکریت توسط روش میکروهماتوکریت تعیین ‌می‌شود، همان طور که توسط براون توصیف ‌شده‌است و به عنوان درصد حجمی سلول‌های متراکم (PCV%) گزارش ‌شده‌است. سطوح هموگلوبین با استفاده از روش ساحلی تخمین زده ‌شده‌است.