دانلود ترجمه مقاله مسیر ترشحی جدید برای پروتئین های نوترکیب – مجله BMC 2015

مشخصات مقاله انگلیسی (PDF)
سال انتشار مقاله	۲۰۱۵
تعداد صفحات مقاله انگلیسی	۷ صفحه با فرمت pdf
رشته های مرتبط با این مقاله	زیست شناسی
گرایش های مرتبط با این مقاله	علوم سلولی و مولکولی، میکروبیولوژی
مجله مربوطه	کارخانه های سلول میکروبی – Microbial Cell Factories
دانشگاه تهیه کننده	دانشکده مهندسی پزشکی و مواد غذایی، دانشگاه شانگهای برای علم و فناوری، چین
کلمات کلیدی این مقاله	مسیر ترشح غیر کلاسیک، ترشح پروتئین نوترکیب، بیان ترشحی، باسیلوس سوبتیلیس
لینک مقاله در سایت مرجع	لینک این مقاله در سایت BMC
نشریه BMC

• فهرست مطالب:

چکیده

پیش زمینه

نتایج

ترشح Nsp با ساختار نامنظم توسط پروتئین های ترشحی از مسیر غیر کلاسیک

موقعیت یابی ترکیب PhoA و پروتئین های ترشحی از مسیر غیر کلاسیک

موقعیت یابی ترکیب BgaB و پروتئین های ترشحی از مسیر غیر کلاسیک

بحث

نتیجه گیری

روش کار

سویه های باکتریایی، پلاسمیدها و شرایط رشد

ساخت پلاسمید

ترانسفورماسیون DNA

الکتروفورز ژل و وسترن بلاتینگ

ارزیابی های آنزیمی

•  بخشی از ترجمه:

ارزیابی های آنزیمی

آنالیزهای PhoA همانگونه که شرح داده شد، انجام شد (۱۸). بعد از الکتروفورز،lµ ۱۰۰ از سوپرناتانت سریعاً در Tris-HCL(PH=8) به lµ ۰٫۵  رقیق سازی شد و با ۰٫۵ میلی لیتر از pNPP 5 درصد، مخلوط شده و سپس به مدت ۱۰ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد انکوبه شد. واکنش با افزودن ۰٫۵ میلی لیتر از NaOH 2 نرمال، متوقف شد و توسط OD410 خوانده شد. میزان فعالیت نسبی PhoA برای ترکیب ها، نسبت به فعالیت نسبی PhoA در باسیلوس سوبتیلیس WB800 دارای پلاسمید p-PhoA-his، همگون سازی شد. فعالیت بتا گالاکتوزیداز BgaB مطابق توصیفات قبلی، تعیین شد (۲۵). یک واحد فعالیت آنزیمی، مقدار آنزیمی است که ۱ میکرومول سوبسترا(ONPG) را در یک دقیقه تجزیه می¬کند.

• بخشی از مقاله انگلیسی:

Enzymatic assays PhoA assays were performed as described previously [18]. After centrifugation, 100 μl of the supernatant was immediately diluted to 0.5 ml in Tris–HCl (pH 8.0), mixed with 0.5 ml of 0.5 % pNPP, and incubated at 37 °C for 10 min. The reaction was stopped by the addition of 0.5 ml of 2 N NaOH, and the OD410 was read. Enzyme activity was normalised to the same OD600. The relative PhoA activity values for the fusions were normalised relative to the PhoA activity in B. subtilis WB800 containing the p-PhoA-his. The activity of β-galactosidase BgaB was determined as described previously [25]. One unit of enzyme activity was defined as the amount of enzyme hydrolysing 1 μmol of substrate (ONPG) per minute.

دانلود رایگان مقاله انگلیسی

خرید ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد