دانلود ترجمه مقاله تنظیم شروع بیان ۵xbT در اندام حرکتی – Biologists 2012

• فهرست مطالب:

خلاصه

مقدمه

مواد و روش ها

سازه های DNA و تجزیه و تحلیل بخش های تنظیمی

تولید رده های تراریخت

جنین ها

جنین های موش با توجه به روش کافمن تولید شدند (Kaufman, 2001)

الکتروپوریشن جوجه

هیبریداسیون کامل درجا (In situ) و هیستوشیمی

روش تغییر حرکت Electrophoretic

نتایج

آنالیز ناحیه تنظیمی ژن Tbx5 موش

ترکیبی از ژن‌های Hox4 و Hox5 در LPM منقاری از جنین‌های اولیه موش بیان شده‌است

ژن‌های PG4 و PG5 Hox می‌توانند بیان lacZ را در روش کو- الکتروپوریشن جوجه فعال کنند

جایگاه های اتصال Hox برای بیان TbX5 محدود به اندام حرکتی جلویی در in vivo

پروتئین های Hox می توانند به طور مستقیم به این جایگاه های کاندید متصل شونده به Hox در in vitro متصل شوند

بحث

ژن های Hox بیان اندام حرکتی جلویی ژن Tbx5 موش را تنظیم می کند

حفظ عنصر تنظیمی Tbx5 اندام حرکتی جلویی

نقش جدید ژن های Hox در تکوین اندام

• بخشی از ترجمه:

حفظ عنصر تنظیمی Tbx5 اندام حرکتی جلویی

الگوی بیان اختصاصی باله جلویی/باله سینه‌ای ژن Tbx5 در تمام گونه های مهره دار مطالعه شده حفظ شده است بنابراین انتظار می رود این عنصر تنظیمی نیز حفظ شده باشد. ثابت شده است که رد پا فیلوژنیکی برای شناسایی بسیاری از نواحی تنظیمی ضروری بسیار مفید است (Boffelli et al., 2004). با این حال، این نوع آنالیز برای شناسایی هر گونه عناصر غیر کد کننده حفظ شده (CNE ها) درون اینترون ۲ Tbx5 با شکست مواجه شده است. اگرچه ما یک CNE در میان آمنیون‌دارای (یعنی جوجه و پستانداران) در in silico یافتیم، این از عنصر تنظیمی بیانی اندام حرکتی جلویی که ما در in vivo و in vitro شناسایی کردیم مشخص است و این CNE قادر به پیش برد بیان گزارشگر هنگامی که در سیستم ما ارزیابی می شود نیست (Fig. 1A, construct 0.8 RV). هنگامی که ما در جستجو در آنالیز CNE های نزدیک تر با توالی اینترون ۲ بودیم، قطعات مختلفی از DNA را که تنها بین پستانداران حفظ شده بودند یافتیم. دورترین حفاظت فیلوژنی در ژنوم صاریغ شناسایی شده است و ناحیه حفاظت شده تنها حاوی یکی از جایگاه های اتصال Hox است (Hbs4) که ما در اینجا نشان دادیم که برای بیان اندام حرکتی جلویی در موش ضروری است.

• بخشی از مقاله انگلیسی:

Conservation of the Tbx5 forelimb regulatory element

The forelimb/pectoral fin-specific expression pattern of Tbx5 is conserved in all vertebrate species analysed and one would therefore expect this regulatory element to be conserved. Phylogenetic footprinting has proven very useful for the identification of many essential regulatory regions (reviewed by Boffelli et al., 2004); however, this type of analysis failed to detect any conserved non-coding elements (CNEs) within Tbx5 intron 2. Although we found a CNE among amniotes (i.e. chicken and mammals) in silico, this was distinct from the forelimb-expression regulatory element we have characterised in vivo and in vitro, and this CNE was not able to drive reporter expression when assayed in our system (Fig. 1A, construct 0.8 RV). When we looked for and analysed CNEs more closely within the intron 2 sequence, we found various stretches of DNA that were conserved only between mammals. The most distant phylogenetic conservation detected lay within the opossum genome and the region of conservation contained only one of the six Hox binding sites (Hbs4) that we have shown here to be required for forelimb expression in the mouse.

دانلود رایگان مقاله انگلیسی

خرید ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد