دانلود ترجمه مقاله پروتکل بهینه شده جهت استخراج پروتئین از بافت پستان – 2011 Sage

پروتکل بهینه شده جهت استخراج پروتئین سازگار با الکتروفورز ژل دو بعدی از بافت پستان

Optimized Protocol for Protein Extraction from the Breast Tissue that is Compatible with Two-Dimensional Gel Electrophoresis

چکیده

مقدمه

مواد و روش ها

نمونه های مورد مطالعه

اجزای سازنده ی بافرها

اندازه گیری غلظت پروتئین

ژل الکتروفورز دو بعدی

نتایج و بحث

نتیجه گیری

چکیده

پروتئومیکس یک روش بسیار آموزنده برای آنالیز تغییرات مرتبط با سرطان در بافت ها است. چالش اصلی در این تکنیک برای استفاده از بافت در مطالعات پروتئومیکس، اندازه ی کوچک نمونه و مشکلات استخراج و حفظ پروتئین ها است. انتخاب بافر سازگار با برنامه های عملکردی پروتئومیکس نیز یک چالش است. در این مقاله ما پروتکل بهینه سازی شده ای را برای کارآمدترین استخراج پروتئین از بافت پستان انسان در یک بافر سازگار با ژل الکتروفورز دو بعدی (2D-GE) توصیف می کنیم. این پروتکل بر اساس تجزیه ی مکانیکی مستقیم بافت ها در بافر 2D-GE است. این روش برای اجرا در امور بالینی، ساده، قوی و آسان است. ما کیفیت بالای جداسازی پروتئین هایی که بر اساس پروتکل گزارش شده در این مقاله آماده شده بودند را نشان می دهیم.

نتیجه گیری

در اینجا ما پروتکل مناسبی را برای استخراج کارآمد پروتئین ها از بافت پستان گزارش می دهیم. امکان استخراج بالا و حفظ پروتئین ها با استفاده از مهره های شیشه ای برای تخریب بافت و استخراج در بافر حاوی اوره فراهم شد. سونیکاسیون و افزایش زمان سانتریفیوژ امکان حذف مواد آلوده کننده و ذرات کوچکی که می توانند جداسازی پروتئین را تحریف کنند؛ فراهم می کند. این کار به خصوص برای حذف لیپیدها موثر است. پروتکل پیشنهاد شده همچنین می تواند برای بافت های دیگر با حداقل بهینه سازی مورد استفاده قرار گیرد.

Abstract

Proteomics is a highly informative approach to analyze cancer-associated transformation in tissues. The main challenge to use a tissue for proteomics studies is the small sample size and difficulties to extract and preserve proteins. The choice of a buffer compatible with proteomics applications is also a challenge. Here we describe a protocol optimized for the most efficient extraction of proteins from the human breast tissue in a buffer compatible with two-dimensional gel electrophoresis (2D-GE). This protocol is based on mechanically assisted disintegration of tissues directly in the 2D-GE buffer. Our method is simple, robust and easy to apply in clinical practice. We demonstrate high quality of separation of proteins prepared according to the reported here protocol.

Conclusion

Here we report a protocol suitable for an efficient extraction of proteins from breast tissue. The high extraction and preservation of proteins was achieved by using glass beads for disruption and extraction in the urea-containing buffer. Sonication and prolonged time of centrifugation allowed removing contaminants and small particles that can distort protein separation. This is especially valid for removal of lipids. The proposed protocol may also be used for other tissues with minimal optimization.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

پروتکل بهینه شده جهت استخراج پروتئین سازگار با الکتروفورز ژل دو بعدی از بافت پستان

Optimized Protocol for Protein Extraction from the Breast Tissue that is Compatible with Two-Dimensional Gel Electrophoresis