دانلود ترجمه مقاله همسانه سازی یک گیرنده استروژن جدید وارد شده در پروستات و تخمدان موش (سال ۱۹۹۶) (ترجمه ویژه – طلایی ⭐️⭐️⭐️)

همسانه سازی یک گیرنده استروژن جدید وارد شده در پروستات و تخمدان موش

Cloning of a novel estrogen receptor expressed in rat prostate and ovary

چکیده

مواد و روش ها

نتایج

بحث و گفتگو

منابع

چکیده

عضو جدیدی از سوپر خانواده گیرنده های هسته ای را همسانه سازی کردیم. cDNA همسانه ۲۹ از کتابخانه cDNA پروستات موش جدا شده و به صورت پروتئین آمینو اسید ۴۸۵ باقی مانده با وزن مولکولی محاسبه شده  kDa 54.2 کدگذاری شد. دلیل منحصر به فرد بودن پروتئین همسانه ۲۹ این است که به شدت با پروتئین گیرنده استروژن موش (ER)، خصوصا در دامنه اتصال DNA (95٪) و در دامنه اتصال لیگاند ترمینال- C (55٪)، هومولوگ است. ورود همسانه ۲۹ در بافت های موش با هیبریداسیون در محل بررسی شد و ورود قابل توجهی در پروستات و تخمدان پیدا شد. در پروستات همسانه ۲۹ در یاخته های روپوشه ای  آلوئول های ترشحی وارد شد در حالی که در تخمدان، سلول های گرانولوزا در فولیکول های اولیه، ثانویه و بالغ ورود همسانه ۲۹ را نشان می دهند. آنالیز اتصال لیگاند اشباع پروتئین همسانه ۲۹ سنتز شده در خارج از بدن، یک جز اتصال دهنده تک برای استرادیول-β۱۷ (E2) با میل ترکیبی زیادی را مشخص کرد (Kd = 0.6 nM). در آزمایشات لیگاند-رقابت، میل ترکیبی بدین ترتیب کاهش می یابد: E2> دی اتیل استیلبیسترول> استریول>استرون> α۵-آندروستان-β۳، β۱۷-دیول>> تستوسترون =پروژسترون=کورتیکوسترون= α۵-آندروستان-β۳، β۱۷-دیول. در آزمایش انتقال سلولی سلول های تخمدان همستر چینی با حامل وارد کننده همسانه ۲۹ و یک ژن گزارشگر تنظیم کننده استروژن، بیشترین تحریک اکتیویته ژن گزارشگر (حدود ۳ برابر) در طی انکوباسیون nM 10 از E2 گزارش شد. هیچ یک از پروژسترون ها، تستوسترون ها، دگزامتازون ها، هورمون تیروئید، اسید تمام ترانس رتینوئیک و یا α۵-آندروستان-β۳، β۱۷-دیول نتوانستند اکتیویته ژن گزارشگر را تحریک کنند، در حالی که استرون و α۵-آندروستان-β۳، β۱۷-دیول توانستند اینکار را انجام دهند. نتیجه گرفتیم که cDNA همسانه ۲۹، ER موش جدیدی را به وجود می آورد، از این رو پیشنهاد می کنیم آن را به صورت ERβ موش نام گذاری شود تا بتوان آن را از ER همسانه شده (ERα) قبلی که از تخمدان موش بدست می آید، تشخیص داد.

بحث و گفتگو

در این مطالعه یک عضو جدید از خانواده گیرنده استروئید شناسایی شد. پروتئین همسانه ۲۹ اتصال با وابستگی بالا استروژن ها را نشان می دهد را نشان می دهد و در سیستم تست فعال سازی ترانس ورود یک ژن گزارشگر ERE حاوی پروتئین همسانه ۲۹ در حضور استروژن ها قابل اندازه گیری است شود. پیشنهاد می کنیم که این همسانه به عنوان ER β موش نامگذاری شود تا بتوان آن را از ER  حالت قبلی (ERa) که از تخمدان موش بدست می آید (۱۷)، تفکیک کرد.

Abstract

We have cloned a novel member of the nuclear receptor superfamily. The cDNA of clone 29 was isolated from a rat prostate cDNA library and it encodes a protein of 485 amino acid residues with a calculated molecular weight of 54.2 kDa. Clone 29 protein is unique in that it is highly homologous to the rat estrogen receptor (ER) protein, particularly in the DNA-binding domain (95%) and in the Cterminal ligand-binding domain (55%). Expression of clone 29 in rat tissues was investigated by in situ hybridization and prominent expression was found in prostate and ovary. In the prostate clone 29 is expressed in the epithelial cells of the secretory alveoli, whereas in the ovary the granulosa cells in primary, secondary, and mature follicles showed expression of clone 29. Saturation ligand-binding analysis of in vitro synthesized clone 29 protein revealed a single binding component for 173-estradiol (E2) with high affinity (Kd= 0.6 nM). In ligand-competition experiments the binding affinity decreased in the order E2 > diethylstilbestrol > estriol > estrone > 5a-androstane-3,,17p-diol >> testosterone = progesterone = corticosterone = 5a-androstane-3a,173-diol. In cotransfection experiments of Chinese hamster ovary cells with a clone 29 expression vector and an estrogen-regulated reporter gene, maximal stimulation (about 3-fold) of reporter gene activity was found during incubation with 10 nM of E2. Neither progesterone, testosterone, dexamethasone, thyroid hormone, all-trans-retinoic acid, nor 5a-androstane-3a,17j3- diol could stimulate reporter gene activity, whereas estrone and 5a-androstane-3p,17j-diol did. We conclude that clone 29 cDNA encodes a novel rat ER, which we suggest be named rat ER8 to distinguish it from the previously cloned ER (ERa) from rat uterus.

DISCUSSION

In this study a novel member of the steroid receptor family was identified. Clone 29 protein displays high-affinity binding of estrogens and in a transactivation assay system activation of the expression of an ERE-containing reporter gene construct by clone 29 protein in the presence of estrogens could be measured. We suggest that this clone be named rat ER3, to differentiate it from the previously cloned ER (ERa) from rat uterus (17).

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد

همسانه سازی یک گیرنده استروژن جدید وارد شده در پروستات و تخمدان موش

Cloning of a novel estrogen receptor expressed in rat prostate and ovary