دانلود ترجمه مقاله آنالیز ژنتیکی اسپورزایی در Magnaporthe grisea با جهش زایی شیمیایی و انتزاعی – Apsnet 1995

تجزیه و تحلیل ژنتیکی اسپورزایی در Magnaporthe grisea با استفاده از جهش زایی شیمیایی و اضافه

Genetic Analysis of Sporulation in Magnaporthe grisea by Chemical and Insertional Mutagenesis

چکیده

مقدمه

نتایج

جداسازی و تعیین فنوتیپی موتانت ها

تجزیه و تحلیل ژنتیکی فنوتیپ های موتانت

شواهدی که نشان می دهد که فنوتیپ های موتانت ناشی از غیرفعال سازی اضافه نیستند

ارتباط اپیتاستیک بین جهش ها

ارتباط پیوندی

بحث

مواد و روش ها

سویه ها و محیط ها

جهش زایی شیمیایی

جهش اضافه از طریق انتقال پلاسمید

تلاقی و تجزیه و تحلیل ژنتیکی

آزمایش رشد، اسپورزایی، تشکیل اپرسوریوم و بیماری زایی

چکیده

جهش زایی درون نهشتی و شیمیایی برای تعیین ژنتیکی گام های حیاتی در مسیر اسپورزایی قارچ بلاست برنج مورد استفاده قرار گرفت. شش موتانت با کونیدیوژنز و مورفولوژی اسپور تغییریافته از نظر ژنتیکی و فنوتیپی توصیف شده است. دو جهش، به نام های con5- و con6- مشخص شده و به طور کامل باعث از بین رفتن تولید کنیدی شدند. مجموعه ای از جهش ها (con1-, con2-, con4- و con7-) در پایین دست con5- و con6- بر رشد کنیدی و کاهش اسپورزایی تاثیر داشتند. جهش های con1- و con2- مراحل اولیه تولید کنیدی را بلوکه کرده و منجر به کاهش بیش از ۹۰ درصدی اسپورزایی و تولید کنیدی هایی با شکل غیر طبیعی می شوند. موتانت con2- در تاریکی کاملا بدون کنیدی بوده، اما در شرایط نور پیوسته کنیدی های بدون دیواره و دوسلولی تولید می کند. یک جهش مستقل (con3-) که باعث تنظیم پاسخ نوری برای اسپورزایی می شود در یک موتانت con2- مشاهده شد. موتانت های con4- و con7- کنیدی هایی با شکل سلول غیر طبیعی تولید کرده و اسپورزایی در آن ها به میزان ۳۵ % کاهش یافته بود. تولید اپرسوریوم، ساختار آلوده کننده مورد نیاز برای ورود به سلول های گیاه، در موتانت های con1- و con7- متوقف شده و در موتانت های con2- و con4- به میزان به ترتیب ۷۰ و ۲۲ درصد کاهش یافته است. بیماری زایی روی برنج در موتانت های con1- و con7- از بین رفته و در موتانت های con2- و con4- به طور معنی داری کاهش یافته است. ۵ جهش (con1-B-، con4-، con5-، con6- و con7-) حاصل از انتقال پلاسمید تفرق همزمان کاملی را با مقاومت هیگرومایسین B نشان داد که بیان می کند که جهش ها، ناشی از غیر فعال سازی درجی هستند. پیوند جفتی بین موتانت ها، نشان دهنده ی پیوند بین CON2 و CON1 (با فاصله ۱۹ سانتی متر) و بین CON6 و CON5 است. یک مسیر شماتیک اسپورزایی بر اساس فنوتیپ های موتانت و روابط اپیستاتیک بین جهش های مختلف استنباط شده است.

آزمایش رشد، اسپورزایی، تشکیل اپرسوریوم و بیماری زایی
مورفولوژی موتانت های اولیه و نتاج آن ها در شرایط اپتیک کنتراست تداخل افتراقی با استفاده از میکروسکوپ تحقیقاتی Olympus BHS مورد بررسی قرار گرفت. فوتومیکروگراف ها با استفاده از فیلم Kodak Technical Pan 2415 گرفته شد. رشد شعاعی موتانت ها و سویه والدی روی آگار اوت میل پس از انکوباسیون به مدت ۹ روز در دمای ۲۶ درجه سلسیوس اندازه گیری شد. در کشت هایی با رشد همزمان، اسپورزایی مورد بررسی قرار گرفت. پلیت ها با پخش کردن ۵۰ میکرولیتر سوسپانسیون اسپور (تقریبا ۱۰۳ اسپور / میلی لیتر) یک سویه ی موتانت، به طور مساوی روی پلیت های اوت میل با قطر ۶ سانتی متر تلقیح شدند. برای موتانت های بدون کنیدی، برای تلقیح پلیت ها از سوسپانسیون قطعات میسلیومی استفاده شد.

Abstract

Chemical and plasmid insertional mutagenesis were used to genetically define critical steps in the sporulation pathway of the rice blast fungus. Six mutants with altered conidiogenesis and spore morphology were genetically and phenotypically characterized. Two mutations, designated con5- and con6-, completely abolish conidial production. A series of mutations (con1-, con2-, con4-, and con7-) downstream from con5- and con6- affect the development of conidia and reduce sporulation. The con1- and con2- mutations block early steps in conidiogenesis, resulting in >90% reduction in sporulation and the production of abnormally shaped conidia. The con2- mutant is completely aconidial in the dark but produces mostly nonseptate or two-celled conidia under continuous illumination. An independent mutation {con3-) that regulates light response for sporulalion was isolated from the con2- mutant. The con4- and con7- mutants produce conidia of abnormal cell shape and reduce sporulation by approximately 35%. Formation of appressoria, the infection structure required for penetration of plant cells, is blocked in the con1- and con7- mutants, and reduced by 70 and 22% in the con2- and con4- mutants, respectively. Palhogenicity on rice is lost in the con1- and con7- mutants and significantly reduced in the con2- and con4- mutants. Five mutations (con1-B-, con41, con5-, con6-, and con7-) derived from plasmid transformation showed perfect cosegregation with hygromycin B resistance, indicating that the mutations are caused by insertional inactivation. Pairwise crosses between mutants suggested linkages between C0N2 and CON1 (19 cM apart), and between CONS and CON6. A schematic sporulation pathway is deduced based on mutant phenotypes and the epistatic relationships among different mutations.

تصویری از مقاله ترجمه و تایپ شده در نرم افزار ورد