دانلود ترجمه مقاله مقايسه انتقال RNA کوتاه تداخلی با ماکروفاژهای حاصل از مونوسيت گاوی – الزویر ۲۰۱۴

مشخصات مقاله انگلیسی (PDF)
سال انتشار	۲۰۱۴
تعداد صفحات مقاله انگلیسی	۹ صفحه با فرمت pdf
رشته های مرتبط با این مقاله	زیست شناسی
گرایش های مرتبط با این مقاله	ژنتیک و علوم سلولی و مولکولی
مجله	ایمونولوژی و ایمونولوپاتولوژی دامپزشکی Veterinary Immunology and Immunopathology
دانشگاه	بخش عفونت و ایمنی، موسسه Roslin و رویال (دیک)، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ادینبورگ، بریتانیا
کلمات کلیدی	گاو، ماکروفاژ، siRNA، الکتروپوریشن، ترانسفکشن
شناسه شاپا یا ISSN	ISSN ۰۱۶۵-۲۴۲۷
رفرنس	دارد ✓
لینک مقاله در سایت مرجع	لینک این مقاله در نشریه Elsevier
نشریه الزویر

• فهرست مطالب:

چکیده

۱٫مقدمه

۲٫ مواد و روش

۲٫۱٫ آماده سازی ماکروفاژهای مشتق شده از مونوسیت گاوی (bMDM)

۲٫۲٫ siRNA دورشته ای

۲٫۳٫ ترانسفکشن

۲٫۴٫ الکتروپوریشن

۲٫۵٫ تعیین کمیت جذب و سمیت سلولی siRNA

۲٫۶٫ تجزیه و تحلیل RT-PCR کمی از کار افتادن ژن هدف و پاسخ اینترفرون

۳٫ نتایج و بحث

۳٫۱٫ تحویل siRNA توسط معرف های ترانسفکشن

۳٫۱٫۱- غربالگری معرف های ترانسفکشن

۳٫۱٫۲٫ بررسی اثرات بالقوه off-target معرف های ترانسفکشن

۳٫۱٫۳٫ از کار انداختن ژن هدف با استفاده از معرف های ترانسفکشن

۳٫۲٫ تحویل siRNA توسط الکتروپوراسیون

۳٫۲٫۱٫ بهینه سازی جذب انتقال siRNA توسط الکتروپوراسیون

۳٫۲٫۲٫ بررسی از کار افتادن ژن هدف و اثرات بالقوه هدف خاموش با الکتروپوراسیون

۳٫۳ نتیجه گیری

• بخشی از ترجمه:

۳٫۳ نتیجه گیری
نتایج گزارش شده در اینجا نشان می دهند که برخلاف این عقیده که ترنسفکت ماکروفاژهای اولیه دشوار است، bMDM اولیه می تواند با siRNA ترنسفکت یا الکتروپوریت شده و منجر به سطوح خوب خاموشی ژن هدف شود. روش شرح شده در بالا در حال حاضر به طور موفق برای خاموش کردن ۹ ژن در bMDM استفاده می شود (دستورالعمل های آماده سازی). امید است که این روش ها یکنقطه شروع را برای بهینه سازی استفاده از siRNA در ماکروفاژهای اولیه از سایر گونه ها و سایر سلول های اولیه که ترنسفکت کردن آن ها دشوار است، مانند سلول های دندریتی فراهم کند. چندین معرف ترنسفکشن مورد آزمایش، برای استفاده مناسب بودند، از جمله: DharmaFECT 3, Lipofectamine 2000 و RNAiMAX. siRNA الکتروپوریت شده باعث خاموشی ژن MEFV در یک سطح قابل مقایسه با siRNA ترنسفکت شده می شود، اما این روش باعث مرگ سلولی بیشتر شده و سلول های باقیمانده قدرت کمتری نسبت به سلول های ترنسفکت شده در بررسی های فعال-سازی پایین دست دارند (داده ها نشان داده نشده است).

• بخشی از مقاله انگلیسی:

۳٫۳٫ Conclusions

The results reported here demonstrate that, contrary to the dogma that primary macrophages are difficult to transfect, primary bMDM can be electroporated or transfected with siRNA resulting in good levels of target gene silencing. The methodologies described above have now been used to successfully silence nine genes in bMDM (manuscripts in preparation). It is hoped that these methodologies will provide a starting point for optimizing siRNA use in primary macrophages from other species and other primary cells which are regarded as being hard to transfect, e.g. dendritic cells. Several of the tested transfection reagents appear suitable for use: DharmaFECT 3, Lipofectamine 2000 and RNAiMAX. Electroporated siRNA silenced the MEFV gene to a comparable level as transfected siRNA, but the procedure resulted in more cell death and the remaining cells were less robust than transfected cells in down-stream activation studies (data not shown).

دانلود رایگان مقاله انگلیسی

خرید ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد